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導致elisa試劑盒變質(zhì)的原因有哪些?
更新時(shí)間:2021-01-15   點(diǎn)擊次數:2108次

elisa試劑盒為什么蛻變?是什么影響了ELISA試劑盒質(zhì)保?一旦蛻變會(huì )有什么影響呢?
1.辦法學(xué)的影響
ELISA測定形式包含以下幾種:雙抗體夾心法、間接法、雙抗原夾心法、IgM抗體捕捉法、競爭抑制法,其間競爭抑制法(HBeAb,HBcAb等選用)因受操作時(shí)差所引起的競爭等要素的影響,成果重復性較差,質(zhì)量較難操控。
2.試劑要素
不同批次的ELISA試劑在制作進(jìn)程中很難保證質(zhì)量*一致,即使是通過(guò)批批檢的項目其檢測成果也存在差異,因而必須挑選和訂購長(cháng)批號的試劑,并保證保存條件。嚴格執行這一規范可以防止因試劑批號改動(dòng)而從頭建立質(zhì)控體系及從頭評估試劑的雜亂進(jìn)程,并且能夠保證成果的穩定性;關(guān)于效期短、使用率低的試劑,應當小量分裝,每次使用則取分裝部分即可,防止重復凍融造成試劑的失效。
3.樣本要素
標本攪擾要素包含內源性攪擾要素和外源性攪擾要素,前者包含類(lèi)風(fēng)濕因子、補體、異嗜性抗體、本身抗體、溶菌酶等,后者包含標本溶血、標本被細菌污染、標本貯存時(shí)刻過(guò)長(cháng)、標本凝結不全、冷凍標本的重復凍融等。
4.操作要素
ELISA操作步驟雜亂,操作不當將引起較大的差錯。加樣、溫育、洗刷、顯色、比色。
5.灰區的設置
通常情況下,ELISA定性試驗以“陽(yáng)性”和“陰性”來(lái)報告成果,兩者間有一條分界線(xiàn)被稱(chēng)為“陽(yáng)性判別值”(cut-offvalue,CO值),這是定性免疫測定成果報告的根據。
6.標本復查
ELISA手工檢測進(jìn)程雜亂,影響要素較多,即使室內質(zhì)控在控,也或許因孔間差異而造成成果的差異,因而加大復查力度是保證成果性的牢靠辦法,比如對HBsAg、HBeAg、HCV-Ab、HIV-Ab、TP-Ab等項目的可疑、弱陽(yáng)性標本及罕見(jiàn)形式的檢測成果進(jìn)行復查。
7.常表明成果的常用辦法
a.定性測定
b.半定量測定成果一般以滴度表明。
c.定量測定即用已知量的規范品作一系列稀釋后進(jìn)行ELISA測定,制作規范曲線(xiàn),成果以肯定量或單位表明。在ELISA定量檢測中每一塊反應板都必須制作相應的規范曲線(xiàn)。
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