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分析ELISA試劑盒操作的幾個(gè)小技巧
更新時(shí)間:2021-09-25   點(diǎn)擊次數:1842次
  ELISA生物試驗是一種敏感性高,特異性強,重復性好的實(shí)驗診斷方法。由于其試劑穩定、易保存,操作簡(jiǎn)便,結果判斷較客觀(guān)等因素,已廣泛應用在免疫學(xué)檢驗的各領(lǐng)域中。為了保證ELISA試劑盒實(shí)驗質(zhì)量,我們需要掌握一些小技巧以助于實(shí)驗的成功,那么ELISA試劑盒的操作技巧您知道嗎?
  如若掌握了這些實(shí)驗技巧之后,在做ELISA實(shí)驗中,試驗起來(lái)會(huì )更熟練,大大的降低了實(shí)驗過(guò)程中的風(fēng)險,ELISA試劑盒實(shí)驗的入門(mén)新手掌握了這些知識后,操作起來(lái)都會(huì )快的多。
  ELISA試劑盒的相關(guān)操作技巧如下:
  1.切記在加酶試劑后用吸水紙在酶標板表面輕拭吸干。
  2.合理安排檢測量,以免反應板過(guò)多造成洗板等待時(shí)間長(cháng)。
  3.在吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
  4.務(wù)必做雙孔實(shí)驗,這樣才既能保證數據的性,又能反映出試劑盒的精密度。
  5.樣品稀釋液應用加液器加注,并經(jīng)常校對其性。
  6.為防止樣品蒸發(fā),試驗時(shí)將反應板放于鋪有濕布的密閉盒內,酶標板加上蓋或覆膜。
  7.未使用完的酶標板或者試劑,請于2-8℃保存。辣根過(guò)氧化物酶標記抗人IgG工作液請依據所需的量配置使用。請勿重復使用已稀釋過(guò)的辣根過(guò)氧化物酶標記抗人IgG工作液。
  8.ELISA試劑盒實(shí)驗中,加樣后及時(shí)放人孵箱,標本較多時(shí),要分批操作。按說(shuō)明步驟嚴格控制操作時(shí)間,防止孵育時(shí)間人為延長(cháng),導致非特異性結合緊附于反應孔周?chē)?,難以清洗*。
  9.剩余樣品及廢棄物應經(jīng)121℃高壓蒸汽滅菌30分鐘,或用5.0g/L次氯酸鈉等消毒劑處理30分鐘后廢棄。
  10.人ELISA試劑盒洗滌時(shí)各孔均需加滿(mǎn)液體,防止孔口有游離酶不能洗凈。
  11.每次實(shí)驗留一孔作為空白調零孔,該孔不加任何試劑,只是最后加底物溶液及2NH2SO4。測量時(shí)先用此孔調OD值至零。
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